脂肪干细胞无细胞提取液的治疗用途皮肤老化创(3) - 临床药物治疗杂志杂志社投稿

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脂肪干细胞无细胞提取液的治疗用途皮肤老化创(3)

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摘要：

2.1.5 脂肪干细胞条件培养基与神经保护脂肪干细胞条件培养基局部移植可营养神经。新生儿缺氧缺血性脑病是引起新生儿急性死亡和慢性神经系统损伤的主要原因之一，具有相当高的发病率和死亡率。WEI等[33]在大鼠脑缺氧缺血性损伤模型中测试了脂肪干细胞条件培养基保护神经元的能力。结果表明脂肪干细胞条件培养基中含有的神经营养因子如胰岛素样生长因子1和脑源性神经营养因子，对神经病变损伤的恢复起着重要作用，改善了缺氧缺血性脑损伤大鼠模型的认知功能和运动功能。SALGADO等[34]分析了在各种微环境下脂肪干细胞分泌的可溶性因子，发现脂肪干细胞可分泌神经生长因子、胶质源性神经营养因子及脑源性神经营养因子等与神经再生密切相关的生长因子，这些神经再生相关的生长因子可能是脂肪干细胞条件培养基促进神经损伤修复的根本原因。

2.1.6 脂肪干细胞条件培养基与呼吸系统呼吸系统是脂肪干细胞条件培养基应用的另一领域。急性呼吸窘迫综合征是临床上急危重症患者死亡的重要原因。研究表明，脂肪干细胞条件培养基中的旁分泌因子能有效减轻急性呼吸窘迫综合征肺损伤的发展，在脂多糖诱导的小鼠急性呼吸窘迫综合征模型中发现使用脂肪干细胞条件培养基可改善肺部炎症组织学变化、抑制支气管肺泡灌洗液蛋白外渗、减少炎症递质肿瘤坏死因子和白细胞介素6的分泌[35]。此外，肺动脉高压和肺纤维化也是呼吸系统的难治愈性疾病，现有的药物干预措施未能改善其临床结果或降低疾病相关死亡率，故而RATHINASABAPATHY等[36]研究了脂肪干细胞条件培养基对肺动脉高压和肺纤维的影响，结果表明：在用野百合碱和博莱霉素诱导的大鼠肺动脉高压和肺纤维化模型中，脂肪干细胞条件培养基通过改善肺血流量和抑制心脏重塑减轻野百合碱诱导的肺动脉高压，以及通过减轻胶原沉积阻止博莱霉素模型肺纤维化的进展，从而改善肺动脉高压和肺纤维化的临床症状，可能为肺动脉高压和肺纤维化的临床治疗提供一种新的方法，但其具体机制仍需进一步的研究。

2.2 脂肪干细胞外泌体

2.2.1 脂肪干细胞外泌体的制备外泌体是由多泡体分泌的直径为30-150 nm不等的膜囊泡，属于胞外囊泡的一种[37]。当前，制备外泌体的方法较多，包括基于外泌体大小和密度的蔗糖梯度离心法[38]，基于不同膜孔径分离的超滤法[39]，以及基于表面标志物的表达吸附、分离的免疫亲和磁珠分离法[40]，还有根据聚合物共沉淀原理的ExoQuick提取法[41]，其中最常用的是基于外泌体大小的超速离心法[42]，即先进行脂肪干细胞体外培养，将达到70%-80%融合的脂肪干细胞用PBS冲洗，接种到无血清培养基中培养48 h后在4 ℃下收集上清液，分别进行300×g离心10 min，2 000×g离心10 min，10 000×g离心30 min以去除细胞和细胞碎片；继续将培养基100 000×g超速离心70 min，将离心管底部的沉淀物重新悬浮于PBS中并冲洗，最后进行100 000×g离心70 min去除外泌体中污染的蛋白质，最终获得外泌体颗粒。

2.2.2 脂肪干细胞外泌体与创面愈合研究表明脂肪干细胞外泌体通过促进成纤维细胞迁移、增殖而促进创面愈合。HU等[43]研究报道外泌体能被成纤维细胞内化，增加N-cadherin、cyclin-1、PCNA和Ⅰ型胶原的基因表达，同时促进成纤维细胞的增殖和迁移；有趣的是，与局部注射相比，静脉注射脂肪干细胞外泌体促进创面愈合效果更好。ZHANG等[44]研究发现脂肪干细胞外泌体主要通过激活PI3K/Akt信号途径，刺激真皮成纤维细胞增殖及迁移，从而促进创面愈合。脂肪干细胞外泌体不仅影响成纤维细胞，还可影响角质形成细胞。受损人角质形成细胞与脂肪干细胞外泌体共培养后，可显著恢复受损人角质形成细胞的迁移能力[45]。田新立等[46]研究发现脂肪干细胞外泌体与角质形成细胞共培养后ERK1/2、AKT和STAT3的磷酸化水平显著增高，说明外泌体可能通过激活ERK1/2、AKT和STAT3信号通路进而影响其增殖及迁移。此外，MA等[47]将人角质形成细胞置于过氧化氢建立皮肤损伤模型，发现脂肪干细胞外泌体也可通过激活Wnt/β-catenin信号通路从而促进其增殖和迁移并抑制凋亡。还有研究报道高表达micoRNA-21的脂肪干细胞外泌体通过增强基质金属蛋白酶9和抑制基质金属蛋白酶抑制剂2的表达从而促进角质形成细胞的增殖和迁移[48]。此外，脂肪干细胞外泌体还可影响内皮细胞。张静等[49]研究发现脂肪干细胞外泌体可通过促进人脐静脉内皮细胞增殖和迁移从而促进血管新生。过表达Nrf2的脂肪干细胞外泌体可促进血管内皮祖细胞增殖、降低炎症蛋白的表达，从而促进糖尿病大鼠足部创面愈合[50]。此外，作为外泌体固定剂和伤口敷料的透明质酸与外泌体联合治疗更能促进小鼠皮肤创面愈合，组织学染色结果显示脂肪干细胞外泌体+透明质酸联合组可见完整的皮肤全层再生和更显著的血管新生[51]。因此，脂肪干细胞外泌体可影响创面修复的主要功能细胞，包括成纤维细胞、角质形成细胞和血管内皮细胞等，从而加速创面愈合，机制可能在于脂肪干细胞外泌体中含有的活性RNA物质。

文章来源：《临床药物治疗杂志》网址: http://www.lcywzlzz.cn/qikandaodu/2021/0622/1185.html